Le sale del Museo di Storia Naturale di New York sono popolate dai personaggi più strani: Attila e gli Unni, i Maya, gli antichi Romani, animali africani e un gigantesco T-Rex. Il guardiano del museo, Larry Daley (Ben Stiller), si dovrà affrontare un'antica maledizione a causa della quale tutte le creature del museo prendono vita di notte, creando a Larry un sacco di problemi e imprevisti.