easy Primer Design 是一款工具,可帮助您在任何地方以高效的方式设计 PCR 引物:在等待实验的工作台上、在上下班途中或在办公室。只需粘贴您的核苷酸序列并指定您的要求,即可为您的 PCR 克隆应用生成引物序列。
特征:
- 使用粘贴按钮输入您的序列。输入的 CDS/序列包含数字、空格、换行符、大写字母还是小写字母?没关系!简单的底漆设计删除了数字、空格和换行符,并将所有内容更改为大写字母!
- 输入不带起始密码子和终止密码子的序列(如果您忘记删除其中一个密码子,则会收到警告消息),以便灵活地设计带有 N 端或 C 端标签的质粒的引物。
-从20多个不同的限制性酶切位点中进行选择,通过BsaI和BsbI支持Golden Gate克隆,甚至可以输入突出端
- 如果您选择的酶会切割您输入的序列,则会收到警告消息
- 通过限制性内切酶选项“其他”实现最大灵活性,如果列表中没有您的限制性内切酶位点,请输入 - 支持非回文序列!如果您输入的限制性位点存在于您输入的序列或其反向互补序列中,您将收到一条警告消息!
- 如果您输入的序列包含不完整的密码子,则会收到警告消息,以避免常见的“复制粘贴”错误!
- 如果您需要,请在正向引物中包含 KOZAK 序列
-选择是否需要起始密码子,以及是否需要终止密码子(所有 3 个常见终止密码子都是可选的)
- 输入引物的熔化温度,其使用盐调整熔化温度计算
-输入盐浓度(Na+)
- 输入两个引物的 5' 末端延伸
-生成的引物以 G 或 C 结尾
-显示熔化温度、G/C含量和引物长度
-透明的设计过程!显示所有中间步骤!您选择的选项将显示在最终结果下方!
- 复制按钮复制整个输出并通过电子邮件将其发送到您的台式电脑以进行下一步设计或将其另存为文件!
-版本0.03更新:新功能“DeletionIn”:帮助您设计重叠延伸PCR的引物,以从序列中删除特定的内部区域(例如删除域)
-版本 0.045 更新:新功能“突变”可帮助您设计用于重叠延伸 PCR 的引物,以突变序列中的特定密码子以编码另一个氨基酸
-版本 0.060 更新:新功能:“DeletionNC”- 帮助您设计引物以从序列中删除 N(5') 或 C(3') 末端区域
-版本 0.080 更新:新功能:“插入”- 在顶部主菜单中向左滑动,找到设计重叠延伸 PCR 引物的帮助,以将插入序列插入到您的序列中
- 版本 0.085 更新:新功能:“替换” - 在顶部主菜单中向左滑动即可获得设计重叠延伸 PCR 引物的帮助,该引物用输入的插入序列替换内部区域
请注意:easy Primer Design 移动应用程序不提供即用型引物序列,它仅在引物设计过程中为您提供支持。用户必须仔细验证生成结果的每个部分的正确性,并进行所有其他必要的测试!
快乐克隆! -希望能帮助到你 :)